來自于色譜系統(tǒng)的污染主要指，HPLC儀器系統(tǒng)中部件磨損而產(chǎn)生的固體顆粒，以及流動相系統(tǒng)過濾不*殘留的固體顆粒。來自于樣品的污染主要指未*溶解的樣品或者已*溶解的樣品進(jìn)入色譜系統(tǒng)中，由于樣品溶劑和流動相溶劑對樣品溶解存在的溶解度差異，導(dǎo)致沉淀析出污染系統(tǒng)。

　　特別是對于中藥 、天然產(chǎn)物、合成中間體及生物藥品的檢測，因基質(zhì)的復(fù)雜性，色譜柱受污染的情況會更加嚴(yán)重。污染會導(dǎo)致色譜系統(tǒng)壓力升高、色譜柱塌陷、填料變色等，從而帶來檢測成本高，測試結(jié)果不準(zhǔn)確等各種影響。

　　以下幾種情況建議使用液相保護(hù)柱：

　　1、中藥、天然產(chǎn)物及合成中間體等基質(zhì)較復(fù)雜的樣品分析--因溶解性差異導(dǎo)致樣品析出而污染分析柱的情況比較嚴(yán)重，梯度洗脫時影響更大。

　　2、生物樣品分析--因樣品的不可逆吸附導(dǎo)致的污染，保護(hù)柱可先于分析柱承受這種污染，從而延長分析柱壽命。

　　保護(hù)柱很重要，但選擇合適的保護(hù)柱更重要，選擇或使用不當(dāng)也可能帶來截然相反的效果。

　　液相保護(hù)柱選擇考慮以下幾方面因素：

　　1、除非特殊情況，一般選擇填料基質(zhì)與分析柱基質(zhì)*相同的保護(hù)柱。

　　2、選擇保護(hù)柱尺寸可按柱體積計算，保護(hù)柱體積按分析柱體積的5%-10%即可；如4.6*250mm的分析柱體積約為4ml，保護(hù)柱體積可選擇在0.2-0.4ml之間為宜。同時，保護(hù)柱內(nèi)徑應(yīng)與分析柱內(nèi)徑相同或相當(dāng)。

　　保護(hù)住使用注意事項：

　　1、獨立式保護(hù)柱與分析柱連接時，連接管路盡可能短，且接口切面平常，盡量減少死體積以降低柱外展寬效應(yīng)。

　　2、卡套式保護(hù)柱一般未標(biāo)注液流方向，使用時最好自行標(biāo)注，并按照標(biāo)注方向來使用，以免正反向使用后，截留的雜質(zhì)污染分析柱。

　　3、直接填裝的短柱型保護(hù)柱，出現(xiàn)柱壓升高或峰型變差時，可不接分析柱進(jìn)行反向清洗，清洗溶劑可參考分析柱清洗溶劑。

　　4、卡套式保護(hù)柱，柱芯替換時，注意柱芯與柱套是否存在方向上的匹配，同時不易旋擰過緊，以防滑絲。

　　5、液相保護(hù)柱或柱芯一般不建議超聲清洗，因可能對填料表面修飾有影響。

　　6、如同一保護(hù)柱配不同的分析柱使用，每次使用前，保護(hù)柱需先清洗并用流動相平衡保護(hù)柱一段時間后，再接分析柱使用。