引入 HPLC 色譜柱的樣品通常多種多樣且復雜，這些樣品可能含有許多與 HPLC 條件不兼容的成分。在沒有適當的樣品制備或樣品預處理的情況下注入此類樣品可能會導致色譜柱堵塞。比如殘留的蛋白質和高疏水性化合物（如脂質）在反相分離過程中也可能不會*洗脫出來，它們往往會慢慢吸附到分析色譜柱上并引起問題。

       不兼容的樣品稀釋劑和流動相也會導致堵塞問題。如果兩者不兼容，當將樣品引入流動相時，如果稀釋劑與流動相兩者對比極性太強，通常會出現樣品沉淀。

       流動相緩沖液通常用作 HPLC 中的流動相，重要的是在使用前過濾這些緩沖鹽。有時，由于實驗室溫度的不同，一些緩沖液成分容易沉淀，又或者使用過高濃度的緩沖液也會導致沉淀。

      來自磨損的泵密封件或其他密封件的碎片，長期使用總會發(fā)生磨損，這些組件往往會在溶劑管路中產生一些碎屑或者金屬離子等。如果不對泵和進樣口進行定期維護，雜質往往會到達色譜柱篩板并堵塞色譜柱。

      現在我們知道了液相色譜柱被阻塞的問題，我們如何保護它？為了保護 HPLC 色譜柱（分析型和制備型）免受污染，例如進樣中的微粒、未過濾的流動相組分或進樣器磨損的泵密封/轉子密封的碎片，建議使用色譜保護柱。

       保護柱本質上是一個微型色譜柱，理想情況下填充與分析柱相同的填料，并連接在分析柱之前。恒譜生有各種尺寸以匹配不同型號的高效色譜柱的要求。保護柱中的篩板與分析柱中的篩板類似，這意味著任何可能阻塞分析柱的東西都會被保護柱阻塞。然后可以通過簡單地更換保護柱或者保護柱篩，從而延長分析柱的使用壽命。

       如何挑選合適的恒譜生保護柱？保護柱的填充材料（固定相）應與分析柱的填充材料相同，以使選擇性不會發(fā)生變化。保護柱的 ID 應與分析柱的 ID 相同或小于分析柱的 ID，以盡量減少增加的譜帶展寬。始終使用 ID 接近色譜柱 ID 的防護裝置。保護柱的長度應盡可能短以避免額外的死體積，可以選擇恒譜生直連保護柱，直接連接UHPLC和UPLC色譜柱，省去中間的連接管路和接頭螺絲，消除溶劑泄露問題與連接死體積，日常操作使用更方便簡潔、更易于操作。