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HPLC色譜柱為什么比GC色譜柱短?

更新時(shí)間:2022-08-05      點(diǎn)擊次數(shù):1776

      HPLC和GC是已在化學(xué)實(shí)驗(yàn)室中站穩(wěn)腳跟的分離技術(shù)。這兩種技術(shù)的基本目的是分離和量化有機(jī)混合物的成分。

        您有沒(méi)有想過(guò)為什么HPLC色譜柱比 GC 色譜柱更短更寬。在回答這個(gè)問(wèn)題之前,您應(yīng)該了解柱長(zhǎng)度的好處。

        一、柱長(zhǎng):

        隨著液相色譜柱長(zhǎng)度的增加,洗脫化合物和固定相之間的相互作用時(shí)間也會(huì)增加,從而提高色譜柱效率和分離度。這導(dǎo)致分離良好的峰。然而,由于柱頭壓力增加和分析時(shí)間增加而面臨的實(shí)際問(wèn)題,不能無(wú)限增加柱長(zhǎng)。

 液相制備柱-DSC_8376

        HPLC 色譜柱的尺寸要求取決于分離目標(biāo)。通常的分析應(yīng)用要求色譜柱長(zhǎng)度為 15 – 25 cm,內(nèi)徑為 4.6 mm,恒譜生的液相分析柱有2.1、3.0、4.0、4.6、7.8內(nèi)徑可選,長(zhǎng)度20-250mm不等。

        如果追求高效率分析,USHA這一系列色譜柱非常適合您。它提高了速度和分辨率??商峁?0- 300 ?孔徑,1.8、2、3、5、10粒徑的色譜填料。同時(shí)有許多不同的固定相可供選擇(C18、C8、苯基、C4、C3、C1、氰基 [CN]、PFP、F-C8 和 C30),建議使用這些色譜柱進(jìn)行小分子反相分離,是非常耐用的液相分析柱。

 液相色譜柱空柱管-DSC_3036

        制備色譜柱可以更寬,直徑范圍為 20 – 50 mm。恒譜生制備柱從10-50內(nèi)徑不等,長(zhǎng)度20-250mm不等,幾乎涵蓋了常用的多種尺寸。即使需要更長(zhǎng)的柱管,恒譜生也能提供定制。

        二、氣相色譜柱:

        氣相色譜柱基本上分為填充柱和毛細(xì)管柱。填充柱通常長(zhǎng)約 1.5 m 或 6ft,外徑為 1/8" 或 3.2mm。另一方面,毛細(xì)管柱長(zhǎng)幾米(10-100m)。填充柱由玻璃或不銹鋼制成,而毛細(xì)管柱由熔融石英軟管制成。柔性管允許將長(zhǎng)柱作為圓形線圈容納到柱溫箱中?,F(xiàn)在檢查兩種技術(shù)在分離過(guò)程中的差異,以得出關(guān)于 GC 和 HPLC 柱之間長(zhǎng)度差異的基本問(wèn)題的合乎邏輯的答案。

        三、流動(dòng)相:

        流動(dòng)相的性質(zhì)——首要的原因是被稱(chēng)為流動(dòng)相的載液的性質(zhì)。HPLC 使用液體作為樣品通過(guò)色譜柱的載體,而在 GC 中,氣流用于攜帶樣品。液體比氣體具有更高的粘度,因此在通過(guò)色譜柱時(shí)會(huì)遇到更大的阻力。色譜柱越長(zhǎng),流動(dòng)相的流動(dòng)阻力越大,因此 HPLC 需要更短的色譜柱長(zhǎng)度。恒譜生小型化液相色譜柱空柱管總成10X20mm就是專(zhuān)門(mén)為需要比較短柱長(zhǎng)的客戶(hù)研發(fā)。死體積很小,管內(nèi)壁光滑,橫截面均勻呈圓形;保證色譜柱制成品的高性能。

 液相分析柱柱管-DSC_1594

        四、樣品:

        樣品揮發(fā)性——注入 HPLC 的樣品是液體,而在 GC 中它可以是液體或氣體。但是,在進(jìn)入 GC 色譜柱之前:由于進(jìn)樣器模塊中的高溫,液體會(huì)轉(zhuǎn)化為蒸氣。氣體在 GC 色譜柱中遇到的阻力較小,這允許使用更長(zhǎng)的色譜柱長(zhǎng)度。

        五、穩(wěn)定性:

        樣品穩(wěn)定性——通過(guò) HPLC 分析的樣品通常是熱不穩(wěn)定的,因此它們?cè)?HPLC 柱中在室溫下處于液相。另一方面,進(jìn)入氣相色譜柱的樣品是具有較低分子量和沸點(diǎn)的氣體。此類(lèi)化合物在通過(guò)色譜柱期間很容易蒸發(fā)并以氣體形式保留。

        進(jìn)一步縮短色譜柱長(zhǎng)度,特別是在新的 UHPLC 應(yīng)用中,導(dǎo)致分析速度加快,靈敏度提高。分析應(yīng)用的未來(lái)趨勢(shì)必然是將 HPLC 色譜柱長(zhǎng)度和分析時(shí)間從幾分鐘縮短到幾秒鐘。


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