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色譜柱填料技術(shù)呈現(xiàn)二大趨勢。一個趨勢是快速液相,利用亞2?m小粒徑硅膠、核殼型硅膠;第二大趨勢是越來越豐富的選擇性。填料的粒度主要影響填充柱的兩個參數(shù),即柱效和背壓。粒度越小,填充柱的柱效越高;小于3μm的填料應(yīng)用,在相同選擇性條件下,提高柱效可提高分離度,但不是位一的因素。如果固定相選擇是真確,但是分離度不夠,那么選擇更小粒度的填料是很用有的,3μm填料填充柱的柱數(shù)比相同條件下的5μm填料的柱效提高近30%。然而,3μm的色相譜的背壓卻是5μm的2倍。與此同時,柱效提高意味...
色譜工作者都知道,在液相色譜儀或者高效液相色譜儀工作時,不能有氣泡進(jìn)入系統(tǒng),否則會出現(xiàn)諸如雜峰、壓力波動不穩(wěn)定和基線噪音等問題。通常對氣泡這種問題,要預(yù)先進(jìn)行處理,如果等到氣泡進(jìn)入系統(tǒng)想要處理,可就不那么容易了。對流動相進(jìn)行提前過濾和脫氣處理,這是一個比較好的解決辦法。大家可能會想,我選擇實驗分析的HPLC級溶劑還要過濾嘛?答案是:還是要過濾的!流動相過濾可以選擇溶劑過濾器,過濾掉里面的雜質(zhì)和避免空氣進(jìn)入系統(tǒng)里。恒譜生溶劑過濾頭可有效濾除流動相中的固體顆粒雜質(zhì),不會產(chǎn)生氣泡,...
無論氣相色譜還是液相色譜,我們最終用來分析實驗結(jié)果的都是色譜峰。zui理想的色譜峰長什么樣呢?它長得如下圖所示,符合高斯分布的兩邊對稱的色譜峰是理想的峰形。而做色譜分析實驗就好像買彩piao,不是每次都有理想的實驗結(jié)果出現(xiàn)的。更多時候,總是會出現(xiàn)一些“奇奇怪怪”的峰型,比如峰拖尾、峰前延、倒峰、寬峰等。為什么會出現(xiàn)這樣的情況呢?要針對不同的峰型來具體分析。比如峰拖尾,這是比較常見的峰型,可能有以下幾種原因:色譜柱如果受到污染,會導(dǎo)致柱效下降,影響分析效果。如果等到發(fā)現(xiàn)柱頭污染...
如果說色譜柱在液相色譜分析中的作用好比人的“大腦”,那么色譜填料就好比我們?nèi)说摹靶呐K”。液相分析結(jié)果好壞和準(zhǔn)確性,與填料有著非常重要的聯(lián)系。液相色譜填料的種類有很多,主要分為聚合物填料、硅膠基質(zhì)填料和其它無機(jī)填料。其中,硅膠基質(zhì)的填料被廣泛應(yīng)用于各種液相色譜分析中。硅膠填料有什么好處呢?硅膠基質(zhì)純度高,pH值通常在2-8之間,有些特殊的硅膠鍵合相的ph值可以穩(wěn)定在pH1.5-10。同時還具有比較高的比表面積,高比表面積具有較強(qiáng)的保留能力、柱容量和分離度;機(jī)械強(qiáng)度大,可以保證在...
一種新的研究方法的誕生,大多是為了彌補(bǔ)現(xiàn)有技術(shù)的不足。反相液相色譜法能解決多種分析應(yīng)用問題,但對極性和親水性化合物很少或無法保留保留。如果使用正相液相色譜法,用己脘或環(huán)已脘來分析這些物質(zhì)也存在一些局限性,很多極性和親水化合物往往很難溶解,從而限制了NPLC的應(yīng)用范圍。在此基礎(chǔ)上,誕生了一種新的解決辦法—親水作用液相色譜(HILIC)。在HILIC色譜柱上,物質(zhì)的洗脫順序與RPLC恰恰相反,在RPLC柱上很難保留或根本不保留的物質(zhì),在通常的實驗條件下,它們在HILIC柱上有較強(qiáng)...
可以說,色譜柱是色譜分析過程中最重要的部分,相當(dāng)于人體的“心臟”。根據(jù)自己要分析的樣品去選擇合適的液相色譜柱,需要考慮不同參數(shù)將會造成什么影響,比如粒徑、酸堿性、極性和分子量大小等。即使是液相色譜柱也分很多類型,比如正相、反相、C18柱、親水性色譜柱等等。只有了解影響分析柱性能的因素,才能結(jié)合目標(biāo)分析物的性質(zhì)、需要達(dá)到的分析效果及實驗室條件來選擇適合的色譜柱。在設(shè)定選擇樣品分析的HPLC方法時,首先需要根據(jù)化合物的分子量大小,極性大小等因素選擇合適的分離模式,在適當(dāng)?shù)姆蛛x模式...