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綠茶被廣泛認(rèn)為是地球上最健康的飲料之一??v觀歷史,綠茶一直被用作治療多種疾病的民間療法,今天它繼續(xù)被提倡作為補(bǔ)充和替代藥物,雖然它一直備受爭(zhēng)議?,F(xiàn)代研究并沒(méi)有消除這些長(zhǎng)期存在的假設(shè),而是讓人們相信綠茶相關(guān)的健康益處。綠茶的藥用特性源自茶樹(shù)種,廣泛歸因于該植物的高酚含量。使用高效液相色譜法(HPLC)進(jìn)行的研究發(fā)現(xiàn),在干葉和芽中含有豐富的多酚,這些天然植物化合物構(gòu)成了一系列代謝組(兒茶素、類黃酮、單寧等),但廣泛的HPLC分析突出了一種代謝物,特別是在涉及綠茶對(duì)人類健康益處的問(wèn)...
高效液相色譜儀(HPLC)是應(yīng)用高效液相色譜原理,主要用于分析高沸點(diǎn)不易揮發(fā)的、受熱不穩(wěn)定的和分子量大的有機(jī)化合物的儀器設(shè)備。它由儲(chǔ)液器、泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測(cè)器、記錄儀等幾部分組成。儲(chǔ)液器中的流動(dòng)相被高壓泵打入系統(tǒng),樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動(dòng)相,被流動(dòng)相載入色譜柱(固定相)內(nèi),由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù),在兩相中做相對(duì)運(yùn)動(dòng)時(shí),經(jīng)過(guò)反復(fù)多次的吸附-解吸的分配過(guò)程,各組分在移動(dòng)速度上產(chǎn)生較大的差別,被分離成單個(gè)組分依次從柱內(nèi)流出,通過(guò)檢測(cè)器時(shí),樣品濃度被轉(zhuǎn)...
在日常別離剖析工作中,反相色譜柱的正確運(yùn)用和維護(hù)十分重要,色譜柱運(yùn)用是否妥當(dāng),直接影響色譜柱的壽命,稍有不慎就會(huì)下降柱效、縮短運(yùn)用壽命甚至損壞。在色譜操作過(guò)程中,需留意下列問(wèn)題,以維護(hù)色譜柱。(1)柱子在裝卸、替換時(shí),動(dòng)作要輕,接頭擰緊要適度。必須防止較強(qiáng)的機(jī)械振動(dòng),避免柱床產(chǎn)生空地。(2)假如儀器用來(lái)做慣例剖析,樣品種類有限,但剖析次數(shù)多,則不妨為每一類慣例剖析配置一根專用柱,這樣有助于延伸柱子的壽命。(3)避免壓力和溫度的急劇變化及任何機(jī)械轟動(dòng)。溫度的忽然變化或者使色譜柱...
任何HPLC或UHPLC柱都是有試用壽命的。正確使用和維護(hù)色譜柱可以延長(zhǎng)其使用壽命,有利于該方法的經(jīng)濟(jì)性。重要的是遵循*的色譜慣例,如適當(dāng)?shù)臉悠分苽洌悠窇?yīng)通過(guò)0.45µm的膜過(guò)濾器進(jìn)行高效液相色譜過(guò)濾,通過(guò)0.22µm的過(guò)濾器進(jìn)行超高效液相色譜過(guò)濾);流動(dòng)相的適當(dāng)質(zhì)量/純度(例如,用于等度模式的等度級(jí)溶劑,用于梯度洗脫的梯度級(jí)溶劑);過(guò)濾流動(dòng)相,發(fā)展良好的方法,具有足夠強(qiáng)的洗脫能力,以盡量減少非特定的吸附;與所選色譜柱兼容的溫度、pH值和最大背壓范圍...
先用正己烷-乙腈(99:1)以0.5ml/min的流速?zèng)_10倍柱體積,再依次以相同的流速相同的用量用氯仿、異丙醇、甲醇、甲醇-水(50:50)沖柱子。以0.5ml/min的流速用30倍柱體積的pH11.0的氫氧化鈉(LUNA)水溶液沖柱子(注意pH值切不可超過(guò)11.0),立即用水(0.5ml/min的流速,30倍柱體積)沖洗,再換成流動(dòng)相。配制流動(dòng)相時(shí),應(yīng)各組分分別量取,比例較小的組分要精密量取,需調(diào)pH值時(shí)要精密到0.1。反相條件下使用時(shí),要特別注意控制pH值范圍,pH值越...
無(wú)論正在利用何種相互作用,液相柱色譜法都分六個(gè)步驟進(jìn)行:柱平衡樣品裝載洗滌洗脫清洗色譜柱再生一、柱平衡:大多數(shù)液相色譜方案從樹(shù)脂平衡步驟開(kāi)始。與目標(biāo)蛋白質(zhì)和所選樹(shù)脂相容的緩沖液通過(guò)柱子。一種常見(jiàn)的做法是用5-10柱體積(CV)的平衡緩沖液平衡柱。例如,蛋白質(zhì)與疏水相互作用樹(shù)脂的結(jié)合在高離子強(qiáng)度下有效。在選擇平衡緩沖液時(shí)也要考慮目標(biāo)蛋白質(zhì)的特性,因?yàn)殡x子強(qiáng)度等緩沖液因素會(huì)受到蛋白質(zhì)穩(wěn)定性的限制;通常,人們會(huì)避免使用會(huì)使感興趣的蛋白質(zhì)變性或阻止其與固定相相互作用的平衡緩沖條件。二...