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許多用戶對溶劑梯度洗脫分離后LC色譜柱應(yīng)該重新平衡多長時間有疑問。在這里,我們展示了對于反相和HILIC分離而言,再平衡周期短的令人滿意的結(jié)果。LC用戶通常會提出和討論關(guān)于在溶劑梯度洗脫分離后重新平衡LC色譜柱多長時間的問題。在本文中,我們根據(jù)最近對該主題的研究討論了細節(jié),并表明即使對于HILIC分離,在兩個柱體積數(shù)量級的短再平衡周期內(nèi)也可以獲得令人滿意的結(jié)果。一、核心概念在溶劑梯度洗脫模式下使用LC時,必須有一段時間,通常是在分析結(jié)束時,在溶劑梯度的第一部分中使用的流動相流...
高效液相色譜法是提取和純化甜味劑的可靠技術(shù)。在食品工業(yè)中被廣泛應(yīng)用;食品糖的甜味與蔗糖相似,熱量只有三分之二。這種五碳糖存在于許多植物中,但大多濃度較低(約1%),因此提取和純化成本很高。因此,迄今為止,食品糖主要通過化學方法生產(chǎn),使用催化木糖脫氫。一、在木糖轉(zhuǎn)化中引入HPLC一種有吸引力的替代方法是通過發(fā)酵將生物質(zhì)(例如麥秸)中的木糖轉(zhuǎn)化為食品糖。通過該工藝,甜味劑可以在溫和條件(大氣壓和環(huán)境溫度)下以高產(chǎn)率生產(chǎn),不含有害化學物質(zhì)。一旦微生物合成了所需的糖醇,就可以通過高效...
溫度的變化會對色譜分析方法的重現(xiàn)性和色譜柱的壽命產(chǎn)生重大影響。但為什么會這樣?恒譜生在以下的內(nèi)容將會為您介紹。一、再現(xiàn)性隨著溫度的變化,液相色譜柱內(nèi)固定相和流動相之間的熱力學會受到直接影響。在不同溫度下運行方法可能會影響分析物容量因子(k)或分析物在色譜柱上的保留時間。在升高的溫度下,流動相和分析物的動能都會增加。分析物動能的增加將導致它們更強烈地移動和振動,并將破壞分子間結(jié)合,即分析物和固定相之間的分離和保留機制。很多時候,這會導致所有分析物更快地從液相色譜柱中流出,從而縮...
緩沖液是一種含有弱酸及其共軛堿(或弱堿及其共軛酸)的水溶液。加入少量強酸或強堿后,緩沖溶液的pH值變化很小,當小的環(huán)境因素發(fā)生變化時,有助于抵消分析方法中的條件變化。緩沖溶液用于將pH值保持在幾乎恒定的值。由于這種弱酸(HA)與其共軛堿之間存在平衡,它們對pH變化具有抵抗力。一、hplc緩沖液的工作原理當一些強酸(更多的H+)被添加到弱酸及其共軛堿的平衡混合物中時,根據(jù)LeChatelier原理,平衡向左移動。類似地,如果將強堿添加到混合物中,則氫離子濃度降低的量小于所添加堿...
影響hplc色譜柱壽命的幾個因素主要包含:流動相因素,樣品因素與其他因素。色譜柱使用過程中應(yīng)該注意這些因素,才能有效增加使用壽命。一、流動相因素1、流動相pH不同基質(zhì)的填料具有不同的pH適用范圍。常溫下無定形硅膠在純水中的溶解度約為100mg?L-1,且在pH1~9的范圍內(nèi)溶解的硅膠量幾乎是常量,考慮到溶解速度的影響,對于硅膠基質(zhì)的填料,其所能承受的流動相pH范圍約為1~8。鍵合相硅膠填料則由于鍵合層的屏蔽作用,使填料對流動相的適應(yīng)范圍大大增加,如現(xiàn)在廣泛使用的反相色譜填料C...
液相色譜的柱子通常分為正相柱和反相柱。正相柱大多以硅膠為柱,或是在硅膠表面鍵合-CN,-NH3等官能團的鍵合相硅膠柱;反相柱填料主要以硅膠為基質(zhì),在其表面鍵合非極性的十八烷基官能團(ODS)稱為C18柱,其它常用的反相柱還有C8,C4,C2和苯基柱等。另外還有離子交換柱,GPC柱,聚合物填料柱等。液相保護柱在使用中最常見的問題:就是柱壓升高,如果柱壓是在長時間使用過程中緩慢增加,屬于正常現(xiàn)象。但柱壓在使用過程中突然升高(系統(tǒng)管路堵塞及壓力傳感器故障除外),可能的原因有如下幾點...