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.氨基柱既可以正相使用,也可以反相使用,但是要注意到的是:正相溶劑和反相溶劑往往是不互溶的,正常情況新氨基柱保存在正相環(huán)境中,例如LUNA氨基柱保存在正己烷-乙腈(99:1)中。正相使用新柱子可直接用流動相。推薦先用正己烷-乙腈(99:1)以0.5ml/min的流速沖10倍柱體積,再根據(jù)流動相選用極性相近的氯仿或二氯甲烷以相同的流速沖10倍柱體積,最后換成流動相。正相使用時,不宜分析含醛基、羰基的化合物,不可用于還原糖的分析;流動相要*脫氣,并不得含有羰基化合物和過氧化物(質(zhì)...
高效液相色譜柱是高效液相色譜的心臟,在高效液相色譜儀的使用中,保持色譜柱的柱效、容量和滲透特性,延長柱子的使用壽命非常重要。色譜柱使用時間后就會出現(xiàn)柱壓升高、柱效降低、峰形畸變和分離度降低、保留時間改變等變化,如不采取措施,將會縮短色譜柱的使用壽命,影響工作效率,并造成一定的經(jīng)濟(jì)損失。因此,有必要加強(qiáng)和規(guī)范色譜柱的管理,從而延長色譜柱的使用壽命。本文從影響色譜柱使用壽命的幾個因素出發(fā),從管理的角度,探討色譜柱的維護(hù)與保養(yǎng)。影響高效液相色譜柱使用壽命的因素1.流動相在以水溶液為...
反相色譜柱為色譜柱提供方便、經(jīng)濟(jì)和有效的保護(hù),延長了色譜柱的壽命,分析結(jié)果的重現(xiàn)性。隨著使用時間的增加,高效液相色譜柱分離效能下降,柱壓增高,其原因主要是由于色譜柱進(jìn)口段的少量填料被污染引起的,而色譜柱整個柱床并未被破壞,使用保護(hù)柱,相當(dāng)于在色譜柱前增加了一段額外的填料,起到了保護(hù)整個色譜柱的作用。反相色譜柱特點:采用高度可控的單分子層形成和封尾技術(shù);高的柱間重現(xiàn)性;高的選擇性和分離效率;適合分離酸性、中性和堿性化合物,以及許多藥物和多肽等。反相色譜柱在使用緩沖液的過程中還要...
HPLC色譜儀器可以是一組單獨的模塊或元件,但也可以設(shè)計為單個裝置。模塊概念在單個組件失效的情況下更加靈活;此外,系統(tǒng)各個零件不必來自同一制造商。如果您不喜歡自己進(jìn)行小修,您會更喜歡緊湊型儀器。然而,這并不需要比模塊化套件更少的工作臺空間。一臺HPLC儀器至少具有溶劑罐、帶篩板的傳輸線、高壓泵、進(jìn)樣裝置、色譜柱、檢測器組成部分。一、高效液相色譜儀HPLC儀器通常由九個基本組件組成:流動相/溶劑容器、溶劑輸送系統(tǒng)、樣品引入裝置、色譜柱、柱后裝置、檢測器、數(shù)據(jù)收集和輸出系統(tǒng)、檢測...
雖然質(zhì)譜聯(lián)用液相色譜已被證明是發(fā)現(xiàn)組學(xué)(蛋白質(zhì)組學(xué)、脂質(zhì)組學(xué)、代謝組學(xué)、食物組學(xué)和糖組學(xué))領(lǐng)域的強(qiáng)大工具。組學(xué)研究經(jīng)常受到樣本復(fù)雜性的挑戰(zhàn)。在處理少量樣品、小體積和復(fù)雜的樣品基質(zhì)(生物流體和單細(xì)胞分析)時,對感興趣的分子進(jìn)行識別和量化可能特別困難。液相色譜柱小型化可以克服這些挑戰(zhàn)。減小色譜柱內(nèi)徑(ID)會降低色譜稀釋度并提高靈敏度,從而實現(xiàn)更高效的MS/MS采樣,從而實現(xiàn)更多的分子鑒定。當(dāng)樣品量被注入色譜柱并被周圍的溶劑稀釋時,就會發(fā)生這種稀釋。在這種情況下,更少的溶劑意味著...
液相色譜作為常用的色譜被廣泛應(yīng)用于生物、化學(xué)、食品分析等領(lǐng)域,hplc的種類有哪些?恒譜生帶你了解!一、液相色譜的種類1、吸附色譜以硅膠或氧化鋁為固定相。分子與硅膠之間的弱相互作用鍵稱為吸附,鍵的溶解解吸。由于洗脫液分子先于樣品分子占據(jù)硅膠的活性位點,因此樣品分子只有在與活性位點的相互作用強(qiáng)于洗脫液分子時才能被吸附。樣品分子通過偶極-偶極相互作用可逆地結(jié)合到固定相。固定相對物質(zhì)的保留時間取決于與固定相表面相互作用的程度不同。這是分離樣品成分的機(jī)制。2、親和層析使用物質(zhì)相互反應(yīng)...