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制備柱具有各種尺寸，可以實現(xiàn)高分辨率分析和快速的分析。在制備色譜中，達到高純度、高回收率和高通量的分離十分重要。制備柱主要應用在植物化學、藥物合成、生物化學等領域的產品的提取及純化工作中。不同的工作領域中組分的制備和純化量的差異較大。在生物技術領域中，酶的分離是μg級；在天然產物化學和合成化學領域中，為應對未知成分定性鑒別、結構測定、生物活性測試等要求，需要純化若干mg級的高純物；在藥品和醫(yī)藥學測試中，需要g級的標準品和對照品；在工業(yè)級提純中，目標產物工業(yè)化生產往往需要kg級...

1.高壓勻漿法裝填液相色譜柱將填料懸浮在適宜的勻漿液中制成勻漿，在其尚未沉降之前，很快以高壓泵將其以很高的流速壓進柱中，便可制備出填充均勻的柱子。這是常見的分析和制備色譜柱的裝填方法。2.濕法裝填對于柱、特別是現(xiàn)在流行的以3-10μm細柱徑填料填裝的分析柱，則必須使用濕法，即勻漿法裝柱。因為，隨著粒徑的縮小，因靜電作用和表面能的加大，粒子間傾向于聚集和“粘結”，若以干法填裝，它們會粘附在連接管及柱壁上，也會因強烈的靜電作用彼此排斥，因而難以填裝出均勻而緊密的柱床。這樣，必須改...

C18色譜柱因鍵合方式的不同、粒徑的不同、長度的不同，內徑的差異等多方面因素，呈現(xiàn)出不同選擇性。柱填料的選擇關系到色譜分離的可能性，而柱規(guī)格的選擇直接影響分析速度、分離能力、檢測能力及每次分析的溶劑消耗等。柱規(guī)格包括兩方面：柱內徑和柱長度。柱內徑，分析型一般為2～6mm,制備型20mm，大者可達80mm；柱長度，分析型5～30cm，制備型15～50cm。一般來說，柱內徑不影響分離度與分析時間的關系。今天，柱技術已發(fā)展到不同柱內徑的柱子能夠具有相同的性能。不同內徑的柱子又各具特...

日常分離分析工作中，c18液相色譜柱的使用和維護十分重要，液相色譜柱使用是否得當，直接影響柱子的壽命，稍有不慎就會降低柱效、縮短使用壽命甚至損壞。液相色譜柱的正確使用：（1）柱子在裝卸、更換時，動作要輕，接頭擰緊要適度。必須防止較強的機械振動，以免柱床產生空隙。（2）如果儀器用來做常規(guī)分析，樣品種類有限，但分析次數(shù)多，則不妨為每一類常規(guī)分析配置一根專用柱，這樣有助于延長柱子的壽命。（3）避免壓力和溫度的急劇變化及任何機械震動。溫度的突然變化或者使色譜柱從高處掉下都會影響柱內的...

1)在pH值正常范圍內(2~8)可選用現(xiàn)代高純硅膠色譜柱，具有峰形好，重現(xiàn)性高和壽命長的特點，選用較短的柱子可以提高分離效率，選用較長的柱子可以增加保留，選用小顆粒度的填料可以提高分離度，對分子量大的組分宜選用大孔徑填料的色譜柱。2)分離極性大的組分(流動相水相過大)采用AQ類似的色譜柱。3)分離生物堿類的化合物選用經過烷基化處理封口的填料可防止堿性化合物的拖尾現(xiàn)象。4)極端酸性條件下(pH小于2)選用ZorbaxStableBondC18類色譜柱或者寬pH值色譜柱。5)低端...

影響C18色譜柱壽命的幾個因素主要包含：流動相因素，樣品因素與其他因素。色譜柱使用過程中應該注意這些因素，才能有效增加使用壽命。一、流動相因素1、流動相pH不同基質的填料具有不同的pH適用范圍。常溫下無定形硅膠在純水中的溶解度約為100mg/L-1，且在pH1～9的范圍內溶解的硅膠量幾乎是常量，考慮到溶解速度的影響，對于硅膠基質的填料，其所能承受的流動相pH范圍約為1～8。鍵合相硅膠填料則由于鍵合層的屏蔽作用，使填料對流動相的適應范圍大大增加，如現(xiàn)在廣泛使用的反相色譜填料C1...